1)菌丝收集过程
通常的菌体收集采用板框过滤的方式,但由于该菌体细小,过滤难度大需添加大量助滤剂才能较顺利过滤,助滤剂添加成本巨大。故也有企业采用高速离心获取菌体,上层轻液再进行板框过滤收集残余菌体,这是一种比较好的方法但菌体罐倒来倒去,设备多,效率较低。采用ULTRA-FLO超滤收集菌体,可将菌体收集、菌体清洗、酶解处理同在一个罐中进行,避免了菌体的损失,同时能充分清洗菌丝;免去助滤剂的添加成本,节约了板框或高速离心机的投资,只要通过适当的时间安排,我们可以实现ULTRA-FLO超滤系统的两用。
2)超滤过程
D-对羟基苯甘氨酸酶解完成后,酶解液直接进入ULTRA-FLO超滤系统进行除蛋白、除菌体、除大分子色素得到澄清透明的滤液。常规工艺在板框过滤酶解液时将有10%左右的收率损失,而通过在超滤流动过程中适当的加水(利用二级纳滤透析液)透析洗涤,可将菌体中的有效成分充分混合透析出来,避免了板框过滤加水顶洗时的“短流现象”(CUT-OFF),实践证明过滤收率在96-99%以上。
3)纳滤预浓缩
根据我们的经验D-对羟基苯甘氨酸在PH9.2时的溶解度较大,可保持在6-7%而不析出,这样可用氨水将超滤澄清液的PH稳定在9.2-9.5,进行常温纳滤浓缩,在不破坏产品的同时将其浓缩6-7%。这样便在低含量时脱除了50%的水。由于D-对羟基苯甘氨酸的分子量较小,为保证膜通量及对小分子无机盐的脱除,我们采用截留分子量为100-150的纳滤膜,此时收率在92-95%,通过对一级纳滤透析液的二级纳滤再浓缩可将纳滤总收率保持在99.2-99.7%以上,二级纳滤在浓缩后期的高单位透析液可用做酶解液超滤过程的顶洗水之用。理论上讲,纳滤的过程应基本没有损失,且实现水的综合利用。
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